Provided is a preparation of a PD-1/CTLA-4 bispecific antibody fragment produced by using a single chain antibody gene as a template and specific high-efficiency amplification primers, performing PCR and overlap PCR, and introducing a disulfide bond into a variable region of the antibody. The gene fragment is cloned into a lentiviral expression vector, transfects a 293T cell to achieve virus packaging, and then a CIK cell comprising a PBMC separated from healthy human peripheral blood is transduced, stimulating T-cell growth using CD3/CD28 magnetic beads and co-culturing the lentivirus with the T cell, so as to obtain a novel anti-tumor T cell capable of blocking immunosuppression signals of tumors and tumor microenvironments, and enhancing anti-tumor cytotoxicity.L'invention concerne une préparation d'un fragment d'anticorps bispécifique dirigé contre PD-1 et CTLA-4, qui est produit par les étapes consistant à utiliser un gène d'anticorps simple chaîne en tant que matrice et des amorces d'amplification spécifiques à haute efficacité, effectuer une PCR et une PCR de chevauchement et introduire une liaison bisulfure dans une région variable de l'anticorps. Le fragment de gène est cloné dans un vecteur d'expression lentiviral, il transfecte une cellule 293T pour effectuer une encapsidation virale, puis une cellule CIK comprenant un PBMC séparé à partir de sang périphérique humain sain est transduite, en stimulant la croissance des lymphocytes T à l'aide de billes magnétiques CD3/CD28 et en co-cultivant les lymphocytes T avec le lentivirus, de manière à obtenir un nouveau lymphocyte T antitumoral capable de bloquer les signaux d'immunosuppression des tumeurs et des micro-environnements tumoraux, et d'accroître la cytotoxicité antitumorale.
