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一种将外源性哺乳动物胞浆蛋白高效定位于细胞核内的方法及其应用
- 专利权人:
- 江西省妇幼保健院
- 发明人:
- 张子宇,邹阳,杨必成,刘发英,罗勇
- 申请号：
- CN201710919044.8
- 公开号：
- CN107630007A
- 申请日:
- 2017.09.30
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 张祥明
- 摘要：
- 本发明公开了一种将外源性哺乳动物胞浆蛋白高效定位于细胞核内的方法及其应用。本方法利用SalI单酶将pRK5‑Sufu‑GFP表达载体进行酶切，再利用连接酶将NLS连接到载体内，之后经转化得到插入NLS数量不等的核定位载体pRK5‑Sufu‑nNLS‑GFP(SnNG)，最后将胞浆蛋白成功定位于细胞核内。本发明方法可以一次性插入多条NLS，同时获得插入n种质粒载体(n为1‑5)，能够将外源性胞浆蛋白高效定位于细胞核内的。实现通过一次性构建带有1～5个NLS的胞浆蛋白，转染这种质粒到小鼠成纤维细胞(MEFs)中，研究这种胞浆蛋白在胞浆/胞核的定位与其在细胞中的生物学活性和功能的量效关系。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
