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鱼类肌肉生长抑素MSTN基因克隆及其基因打靶载体构建
- 专利权人:
- 中国水产科学研究院黄海水产研究所
- 发明人:
- 陈松林,叶寒青,沙珍霞
- 申请号:
- CN200510104768.4
- 公开号:
- CN100347298C
- 申请日:
- 2005.12.30
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2007
- 代理人:
- 袁和善
- 摘要:
- 一种鱼类肌肉生长抑素MSTN基因及其基因打靶载体,它的方法是分离克隆了花鲈MSTN基因,其全长为4873bp,包括3个外显子,2个内含子,5’调控序列和非翻译区以及3’非翻译区。根据测定出的花鲈MSTN基因序列,设计引物,扩增得到该基因的一个3.2KB的长片段和一个1.5KB的短片段,将这两个片段依次连接到pBSII+KS载体上,获得重组载体p+MSTN3.2+MSTN1.5,然后将正选择标记基因neo片段连接到上述MSTN基因长片段和短片段的中间,形成p+MSTN3.2+MSTN1.5+neo的重组载体;最后将负选择标记基因SVTK-tk片段连接到上述长片段的侧翼,最后获得p+MSTN3.2+MSTN1.5+neo+tk的基因打靶载体。本发明克隆了鱼类MSTN全长基因,并首次构建了鱼类MSTN基因打靶载体,可用于各种鱼类MSTN基因克隆及基因打靶载体的构建,在鱼类基因工程育种上具有重要应用价值。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/