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猪N-乙酰谷氨酸合成酶多克隆抗体的制备方法及其应用
- 专利权人:
- 印遇龙
- 发明人:
- 印遇龙,黄瑞林,储武英
- 申请号：
- CN200810031259.7
- 公开号：
- CN100564531C
- 申请日:
- 2008.05.09
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2009
- 代理人:
- 周 咏`米中业
- 摘要：
- 本发明公开了一种猪N-乙酰谷氨酸合成酶多克隆抗体的制备方法及其应用，其步骤是：克隆猪的NAGS基因，根据该基因序列设计并合成引物，将获得的表达全长猪N-乙酰谷氨酸合成酶的重组原核表达质粒pLM1-NAGS转化到大肠杆菌BL21中；培养转化重组质粒的BL21到OD值为0.4；在培养的大肠杆菌BL21中加入IPTG 0.2mM，诱导；将诱导后的菌体离心收集，用PBS重悬，加入溶菌酶裂解，再超声波破碎，把破碎后的菌液离心，收集上清；使用Hitrap chealtingHP镍亲和层析柱纯化蛋白；用纯化后的N-乙酰谷氨酸合成酶作为抗原免疫日本大耳白黑眼兔，得到N-乙酰谷氨酸合成酶的多克隆抗体，用不完全福氏佐剂加强；得到相应的抗血清。本发明能检测不同发育阶段NAGS在哺乳仔猪体内的分布和表达活性的变化。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
