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猪N-乙酰谷氨酸合成酶多克隆抗体的制备方法及其应用
专利权人:
印遇龙
发明人:
印遇龙,黄瑞林,储武英
申请号:
CN200810031259.7
公开号:
CN100564531C
申请日:
2008.05.09
申请国别(地区):
中国
年份:
2009
代理人:
周 咏`米中业
摘要:
本发明公开了一种猪N-乙酰谷氨酸合成酶多克隆抗体的制备方法及其应用,其步骤是:克隆猪的NAGS基因,根据该基因序列设计并合成引物,将获得的表达全长猪N-乙酰谷氨酸合成酶的重组原核表达质粒pLM1-NAGS转化到大肠杆菌BL21中;培养转化重组质粒的BL21到OD值为0.4;在培养的大肠杆菌BL21中加入IPTG 0.2mM,诱导;将诱导后的菌体离心收集,用PBS重悬,加入溶菌酶裂解,再超声波破碎,把破碎后的菌液离心,收集上清;使用Hitrap chealtingHP镍亲和层析柱纯化蛋白;用纯化后的N-乙酰谷氨酸合成酶作为抗原免疫日本大耳白黑眼兔,得到N-乙酰谷氨酸合成酶的多克隆抗体,用不完全福氏佐剂加强;得到相应的抗血清。本发明能检测不同发育阶段NAGS在哺乳仔猪体内的分布和表达活性的变化。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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