Disclosed herein are methods for generating recombinant DNA molecules in cells using homologous recombination mediated by recombinases and similar proteins. The methods promote high efficiency homologous recombination in bacterial cells, and in eukaryotic cells such as mammalian cells. The methods are useful for cloning, the generation of transgenic and knockout animals, and gene replacement. The methods are also useful for subcloning large DNA fragments without the need for restriction enyzmes. The methods are also useful for repairing single or multiple base mutations to wild type or creating specific mutations in the genome. Also disclosed are bacterial strains which are useful for high-efficiency homologous recombination.La présente invention concerne des procédés visant à la génération de molécules dADN de recombinaison dans les cellules par recombinaison dhomologues, sous la médiation de recombinases et de protéines similaires. Ce procédé confère une grande efficacité à la recombinaison dhomologues dans des cellules bactériennes, mais aussi dans des cellules eucaryotes telles que les cellules mammaliennes. Ce procédé qui est particulièrement adapté au clonage, permet la génération danimaux transgéniques et k.o. ainsi que le remplacement de gènes. Le procédé convient également pour le sous-clonage de fragments longs dADN sans quil y ait besoin denzymes de restriction. Le procédé convient aussi pour la réparation de mutations de base simples ou multiples affectant un type sauvage ou pour créer dans le génome des mutations spécifiques. Linvention concerne enfin des souches bactériennes convenant pour lobtention de rendements élevés dans la recombinaison dhomologues.
