植物多基因敲除载体的构建及应用
- 专利权人:
- 中国水稻研究所
- 发明人:
- 王克剑,王春,沈兰,付亚萍,严长杰
- 申请号：
- CN201510485573.2
- 公开号：
- CN105112435B
- 申请日:
- 2015.08.09
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 金祺
- 摘要：
- 本发明公开了一种植物多基因敲除载体的构建及应用，包括如下步骤：1)、双元表达载体pC1300‑Cas9的构建；2)、中间载体SK‑gRNA的构建；3)、单个目的gRNA的构建；4)、多个gRNA的串联及最终双元表达载体的构建。本发明利用同尾酶连接的方法将多个gRNA序列连接至已有Cas9序列的双元表达载体上，进而通过农杆菌侵染的转基因技术获得植物多突变体。利用这种同尾酶连接的构建策略，可以组合多个gRNA，通过一次转基因就可获得植物多突变体，从而建立了一种高效、便捷制备植物多突变体的方法。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
