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TALENs介导的奶山羊成纤维细胞基因敲除和基因定点插入的方法
- 专利权人:
- 内蒙古大学
- 发明人:
- 李雪玲,刘慧,刘畅,崔思朋,赵宇航
- 申请号:
- CN201510978161.2
- 公开号:
- CN106119203A
- 申请日:
- 2015.12.23
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 王文君
- 摘要:
- 本发明公开了TALENs介导的奶山羊成纤维细胞基因敲除和基因定点插入的方法,其是根据奶山羊CSN2基因序列,获得针对第二外显子的TALENs表达载体,并根据TALENs作用位点设计含有外源基因的且可以整合至宿主基因组中的打靶载体,然后将上述TALENs表达载体和打靶载体共同转入奶山羊成纤维细胞中,获得CSN2基因敲除且定点整合外源基因的细胞。TALENs技术具有实验设计简单准确、实验周期短、成本低、成功率高、脱靶情况少等优点。利用本方法可以快速获得双等位基因整合的细胞克隆,细胞不经过药物筛选,提高了所获得体细胞的核移植和胚胎发育质量,不含有抗性基因,大大简化了生物安全评价。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/