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罗布麻DNA解旋酶基因APDH1序列及其克隆与应用
- 专利权人:
- 山东农业大学
- 发明人:
- 沈法富,韩秀兰,于元杰,尹承佾
- 申请号:
- CN200510045084.1
- 公开号:
- CN100351380C
- 申请日:
- 2005.11.16
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2007
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明涉及罗布麻DNA解旋酶基因APDH1的克隆、重组、耐盐性功能分析及其转基因耐盐碱棉花的选育,属于分子生物学和生物技术领域。利用抑制差减杂交技术,构建盐胁迫和正常条件下罗布麻mRNA正向差减cDNA文库,对从差减文库中筛选的阳性cDNA克隆进行酶切、PCR与逆向Northern斑点杂交鉴定、DNA测序以及核苷酸序列同源性比较,获得一系列盐诱导表达的cDNA序列,其中有一段序列为DNA解旋酶基因的中间片段。然后进行3′和5′末端快速扩增获得编码罗布麻DNA解旋酶全长cDNA,将其命名为APDH1。进一步,构建正义表达载体,转化棉花。获得的转基因棉花植株可以在0.45%的盐碱地正常出苗、开花和吐絮,而非转基因棉花则不能出苗或者在生长过程中死亡。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/