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罗布麻DNA解旋酶基因APDH1序列及其克隆与应用
专利权人:
山东农业大学
发明人:
沈法富,韩秀兰,于元杰,尹承佾
申请号:
CN200510045084.1
公开号:
CN100351380C
申请日:
2005.11.16
申请国别(地区):
中国
年份:
2007
代理人:
摘要:
本发明涉及罗布麻DNA解旋酶基因APDH1的克隆、重组、耐盐性功能分析及其转基因耐盐碱棉花的选育,属于分子生物学和生物技术领域。利用抑制差减杂交技术,构建盐胁迫和正常条件下罗布麻mRNA正向差减cDNA文库,对从差减文库中筛选的阳性cDNA克隆进行酶切、PCR与逆向Northern斑点杂交鉴定、DNA测序以及核苷酸序列同源性比较,获得一系列盐诱导表达的cDNA序列,其中有一段序列为DNA解旋酶基因的中间片段。然后进行3′和5′末端快速扩增获得编码罗布麻DNA解旋酶全长cDNA,将其命名为APDH1。进一步,构建正义表达载体,转化棉花。获得的转基因棉花植株可以在0.45%的盐碱地正常出苗、开花和吐絮,而非转基因棉花则不能出苗或者在生长过程中死亡。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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