There is provided a method of producing a carrier polypeptide, the method comprising incorporating a first unnatural amino acid in a carrier polypeptide variants, incorporating a second unnatural amino acid in a target polypeptide variant, and reacting the first and second unnatural amino acid comprises generating a zygote. Conjugate produced using the provided methods are also provided. Furthermore, a method of manufacturing the carrier and target polypeptide variants comprising unnatural amino acids using orthogonal translation system and these systems in a methylotrophic yeast is provided.キャリアポリペプチドを製造する方法が提供され、該方法は、第一の非天然アミノ酸をキャリアポリペプチド変異体中に組み入れること、第二の非天然アミノ酸を標的ポリペプチド変異体中に組み入れること、並びに第一及び第二の非天然アミノ酸を反応させて接合体を生成させることを含む。提供された方法を使用して製造される接合体も提供される。さらに、メチロトローフ酵母における直交性翻訳系並びにこれらの系を使用して非天然アミノ酸を含むキャリア及び標的ポリペプチド変異体を製造する方法が提供される。
