本发明公开了一种抗人α‑烯醇化酶(ENO1)抗体,其可结合含人ENO1蛋白(Genbank:AAH50642.1)的氨基酸序列296FDQDDWGAWQKFTA309(SEQ ID NO:9)和/或326KRIAKAVNEKS336(SEQ ID NO:10)的肽,具有良好的结合活性(结合亲和力约为2.19×10‑10mol/L)和显著的抑制各种肿瘤的细胞侵袭和肿瘤转移的能力。本发明鉴别的肽和抗体可用于已报道在细胞表面表达ENO1的癌症(如,包括肺癌、乳腺癌、胰腺癌、肝癌、结直肠癌、前列腺癌和实体瘤)的诊断、预后和治疗。