本发明涉及一种蜂毒阴离子抗菌肽AcHy-a2,其具有SEQ ID NO:1所示氨基酸序列或者为如SEQ ID NO:1所示氨基酸序列经过一个或多个氨基酸取代、添加或缺失而形成的、对革兰氏阳性菌具有抑制作用的衍生多肽;还涉及编码该肽的多核苷酸,含有该多核苷酸的构建体、表达载体和转化的细胞,该肽的制备方法及医药用途。本发明的蜂毒阴离子抗菌肽AcHy-a2可来源于天然动物资源,属于抗菌肽,与传统抗菌药物相比,具有活性高、毒副作用小、不易产生耐药性、体内无药物残留等优点,又因其结构简单、人工合成方便、能很好地解决细菌对传统抗菌药物日益增强的耐药性问题而具有较好的临床应用前景。