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タンパク質の精製
专利权人:
イー・エム・デイー・ミリポア・コーポレイシヨン
发明人:
モヤ,ウイルソン,ジヤバー,ジヤド
申请号:
JP2011542108
公开号:
JP2012512244A
申请日:
2009.12.02
申请国别(地区):
JP
年份:
2012
代理人:
摘要:
The present invention relates to a bimodal polymer such as a soluble polymer capable of irreversibly binding to insoluble particulates and a subset of soluble impurities and also capable of reversibly binding to one or more desired biomolecules in an unclarified biological material containing stream and the methods of using such a material to purify one or more desired biomolecules from such a stream without the need for prior clarification. Such a polymer comprises domains of charged pendant groups such as primary, secondary, tertiary or quaternary amines, (first mode) and is rendered insoluble and precipitates out of solution simply upon complexing with oppositely charged solid particulates and a fraction of the soluble impurities in an amount sufficient to form an aggregate that can no longer be held in solution. The polymer further comprises other domains of pendant groups that are charged or uncharged, hydrophilic or hydrophobic or have a ligand that is selective for the biomolecule of interest depending on the process conditions such as pH, ionic strength, salts, and the like (second mode). When present in one mode, such as the uncharged form, said pendant groups are capable of binding to one or more desired biomolecules within the stream (protein, polypeptide, etc) in an unclarified cell broth. The precipitate can then be removed from the stream, such as by being filtered out from the remainder of the stream and the desired biomolecule is recovered such as by selective elution.本発明は、バイモダルポリマー、例えば、不溶性粒子と可溶性不純物のサブセットとに不可逆的に結合することができ、未清澄生体物質含有ストリームの中の1つ以上の所望の生体分子に可逆的に結合することもできる可溶性ポリマーに関し、ならびに事前に清澄化する必要なく、このようなストリームからの1つ以上の所望の生体分子を精製するためにこのような材料を使用する方法に関する。このようなポリマーは、第一、第二、第三または第四アミンなどの荷電ペンダント基のドメインを含み(第一モード);ならびに溶解状態でもはや保持され得ない凝集体を形成するために十分な量の、反対の電荷を有する固体粒子および可溶性不純物の一部分と単に複合体を形成することにより、不溶性にされ、溶液から沈殿する。ポリマーは、pH、イオン強度、塩などのプロセス条件に依存して、荷電または非荷電、親水性または疎水性であるペンダント基の他のドメインをさらに含むか、対象の生体分子に対して選択的であるリガンドを有する(第二モード)。非荷電形態などの1つのモードで存在するとき、前記ペンダント基は、未清澄細胞ブロスに関するストリーム中の1つ以上の所望
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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