The present invention relates to a mesenchymal stem cell culture for prevention or treatment of immune diseases or inflammatory diseases and to a preparation method thereof. Secreting the immunomodulator PGE2 at a high concentration and exhibiting an outstanding inhibitory effect on immune responses and the release of inflammatory cytokines, compared to stem cell cultures prepared in a two-dimensional manner according to conventional methods, the stem cell culture prepared by three-dimensionally culturing mesenchymal stem cells in a serum-free medium with the aid of a biocompatible scaffold in accordance with method of the present invention can be usefully used as a composition for prevention or treatment of the immune diseases or inflammatory diseases.본 발명은 면역 질환 또는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 중간엽줄기세포 배양액 및 이의 제조방법에 관한 것으로, 본 발명의 방법에 따라 중간엽줄기세포를 무혈청 배지 중 생체적합성 스캐폴드를 이용하여 3차원 배양하여 얻어지는 줄기세포 배양액은 종래의 방법에 따라 2차원 배양하여 얻어지는 줄기세포 배양액보다 면역조절인자인 PGE2가 고농도로 분비되고, 면역반응 억제 및 염증성 사이토카인 분비 억제 효과가 우수하므로, 면역 질환 또는 염증성 질환을 예방 또는 치료하는 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.