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一种基于家蚕杆状病毒多角体溶解特性的融合蛋白纯化方法
- 专利权人:
- 天津耀宇生物技术有限公司
- 发明人:
- 张耀洲,舒特俊,陈剑清,白舒婉,陈昊
- 申请号：
- CN201110443268.9
- 公开号：
- CN102517319A
- 申请日:
- 2011.12.27
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2012
- 代理人:
- 闫立德
- 摘要：
- 本发明涉及一种基于家蚕杆状病毒多角体溶解特性的融合蛋白的表达、纯化方法和用于实施上述融合蛋白表达、纯化方法的高效融合表达载体。本发明将家蚕多角体基因(Polh)与目的蛋白基因构建到原核表达载体中，并在二者之间引入一个蛋白酶酶切位点，使其在原核表达菌中融合表达；利用多角体蛋白在碱性条件下溶解而中性条件下沉淀的溶解度特性，通过不同pH值缓冲液对诱导菌体超声后的沉淀进行洗涤，将最后收集所得沉淀用高pH的缓冲液溶解，离心后将收集的上清pH值调回到中性条件，离心收集沉淀即为分离纯化得到的融合蛋白；特异性蛋白酶酶切纯化后融合蛋白的多角体蛋白标签，再通过镍柱分离纯化得到目的蛋白，建立了原核表达的基于家蚕多角体蛋白溶解度特性的融合蛋白纯化方法。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
