PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a method for directly differentiating pluripotent stem cells into functional myocardium. SOLUTION: (i) an effective amount of (a) BMP4, activin A, FGF2, GSK3 inhibitor, and (b) albumin, transferrin, ethanolamine, sodium selenite, L-carnitine HCl, hydrocortisone, fatty acid supplement, A step of culturing pluripotent stem cells in a basal medium containing a serum-free supplement to obtain a final concentration of triiodo-L-thyronine (T3), thereby inducing differentiation of the pluripotent stem cells into mesoderm (Ii) culturing the cells obtained in step (i) in a basal medium containing an effective amount of a Wnt signaling pathway inhibitor and a serum-free supplement as in (i), whereby the heart of the cells is (Iii) culturing the cells obtained in step (ii) in an effective amount of basal medium of (i) under mechanical stimulation, thereby promoting maturation of the heart A method comprising the steps of: [Selection diagram] None【課題】多能性幹細胞から機能的心筋へと直接分化させる方法の提供。【解決手段】（ｉ）有効量の（ａ）ＢＭＰ４、アクチビンＡ、ＦＧＦ２、ＧＳＫ３阻害剤、及び（ｂ）アルブミン、トランスフェリン、エタノールアミン、亜セレン酸ナトリウム、Ｌ－カルニチンＨＣｌ、ヒドロコルチゾン、脂肪酸サプリメント、トリヨード－Ｌ－チロニン（Ｔ３）の最終濃度が得られる無血清サプリメントを含む、基本培地中で多能性幹細胞を培養し、これにより、該多能性幹細胞の中胚葉への分化を誘導する工程；（ｉｉ）有効量のＷｎｔシグナル伝達経路阻害剤及び（ｉ）におけるような無血清サプリメントを含む基本培地中で、工程（ｉ）で得られた細胞を培養し、これにより、該細胞の心臓への分化を誘導する工程；及び（ｉｉｉ）機械的刺激下で有効量の（ｉ）の基本培地中で、工程（ｉｉ）で得られた細胞を培養し、これにより、心臓の成熟を促進する工程を含む、方法。【選択図】なし
