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一种农杆菌介导的米曲霉PyrG营养缺陷型突变体构建
- 专利权人:
- 江西科技师范大学
- 发明人:
- 胡志宏,曾斌,牛亚丽,孙云龙
- 申请号：
- CN201810758746.7
- 公开号：
- CN108841735A
- 申请日:
- 2018.07.11
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 喻莎
- 摘要：
- 本发明提供了一种农杆菌介导的米曲霉PyrG营养缺陷型突变体构建，主要包含以下步骤：(1)构建含有PyrG上下游的双元载体；(2)双元载体转化农杆菌AGL1；(3)在DPY培养基培养野生型米曲霉3.042，3天后洗下孢子；(4)孢子与含有目的载体的农杆菌共培养60小时；(5)共培养后的孢子转移到含有头孢，Ura/Uri和5‑FOA的CD培养基筛选；(6)筛选培养基生长出来的转化子单菌落进一步在不同培养基上培养，通过生长表型验证是否为PyrG营养缺陷型；(7)验证后的米曲霉提DNA，进一步PCR验证。本发明首次建立了由农杆菌介导的米曲霉PyrG基因敲除体系；较原来的诱变筛选或者原生质体介导的基因敲除体系减少工作量，提高了敲除效率，构建了一种营养缺陷型米曲霉，可以为其遗传操作奠定了基础。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
