本发明属于新城疫疫苗技术领域,具体涉及一种新城疫病毒样颗粒、制备方法及其应用的专利申请。该病毒样颗粒由新城疫病毒M蛋白、F蛋白、NP蛋白和HN蛋白自行组装形成的空心化结构的蛋白颗粒;其中M蛋白对应的M1基因的碱基序列如SEQ ID NO.1所示,F蛋白对应的F1基因的碱基序列如SEQ ID NO.2所示,NP蛋白对应的NP1基因的碱基序列如SEQ ID NO.3所示,HN蛋白对应的HN1基因的碱基序列如SEQ ID NO.4所示。本发明具有结构蛋白表达水平高、病毒样颗粒自行组装,免疫原性与真实病毒粒子更为接近、病毒样颗粒的产量和纯度高、免疫效果好等技术优势。