The present invention provides a method for producing a composition having killer activity, and the like. The method for preparing a composition having a cell killing activity comprises culturing a malignant tumor-derived cell in a culture medium at least until the density of cells becomes a density without passage, and after the culture, the culture medium is physiologically buffered And exchanging the solution, and recovering the physiological buffered saline solution after a period in which morphological cell death of the malignant tumor-derived cells is observed in the physiological buffered saline solution.본 발명은, 살세포 활성을 가지는 조성물의 제조 방법 등을 제공한다. 살세포 활성을 가지는 조성물의 제조 방법은, 악성종양 유래 세포를, 적어도 세포의 밀도가 계대에 지장이 없는 밀도가 될 때까지 배양 배지 중에서 배양하는 것, 상기 배양 후, 상기 배양 배지를 생리적 완충 염류 용액과 교환하는 것, 및 상기 생리적 완충 염류 용액 중에서, 상기 악성종양 유래 세포의 형태학적으로 세포의 사멸이 관찰되는 시기 후, 상기 생리적 완충 염류 용액을 회수하는 것을 포함한다.
