骨硬化蛋白单链抗体的制备方法和用途
- 专利权人:
- 中国人民解放军总医院
- 发明人:
- 姜华,姚琦,唐佩福
- 申请号:
- CN201711379304.3
- 公开号:
- CN108101984A
- 申请日:
- 2017.12.18
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 摘要:
- 骨硬化蛋白单链抗体的制备方法和用途,本发明制备方法如下:提取抗SOST单克隆抗体5H3D1杂交瘤细胞总RNA,用RT‑PCR方法扩增抗体轻链可变区基因和重链可变区基因通过重叠延伸拼接PCR方法,在VL和VH基因之间引入Linker3,连接成单链抗体SOST‑scFv。将测序正确的scFv基因克隆至表达载体PET‑22b(+)后转入E.coliBL21进行可溶性表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS‑PAGE鉴定表达产物,ELISA和West‑blot检测表达蛋白的反应活性。本发明具有分子量小、渗透性高、抗原结合活性高、显著的促进骨生成抑制骨流失的优点。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心