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一步法实时定量荧光PCR检测香石竹斑驳病毒的方法
- 专利权人:
- 云南省农业科学院花卉研究所
- 发明人:
- 刘冠泽,王丽花,张艺萍,杨秀梅,瞿素萍,许凤,王继华,苏艳,张丽芳
- 申请号:
- CN201611255119.9
- 公开号:
- CN106755581A
- 申请日:
- 2016.12.30
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 康珉
- 摘要:
- 本发明公开一步法实时定量荧光PCR检测香石竹斑驳病毒的方法。其主要特征在于靶基因为CarMV分离物CP基因经过克隆后,构建质粒载体,选取正确的质粒载体经线性化体外转录后,计算提纯后ssRNA用10倍梯度稀释,配制拷贝数为2×102‑2×106copies阳性ssRNA制作标准曲线,并设计香石竹斑驳病毒特异性检测的引物对和Taqman荧光探针,设计实验找到最优化条件下引物的退火温度、引物浓度、探针浓度,并采用一步实时定量RT‑PCR检测方法进行定量检测。本发明方法能快速、可靠的检测出香石竹斑驳病毒,并可对所含病毒进行定量。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/