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一种咸丰白术ISSR分子标记优化体系构建方法
- 专利权人:
- 湖北省农业科学院中药材研究所
- 发明人:
- 卢超,张美德,何银生,艾伦强,周武先,段媛媛,刘海华
- 申请号:
- CN201810731338.2
- 公开号:
- CN109082476A
- 申请日:
- 2018.07.05
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 刘长春
- 摘要:
- 本发明给出一种咸丰白术ISSR分子标记优化体系构建方法,其包括提取咸丰白术基因组DNA;检测咸丰白术基因组DNA的完整性,并验证咸丰白术基因组DNA的纯度;根据初筛引物对咸丰白术基因组DNA进行ISSR‑PCR扩增。所述ISSR‑PCR扩增体系为:18μl反应体系中含有2xTaq Master Mix 9.6μl,模板DNA 47ng,初筛引物为0.29μM。所述ISSR‑PCR扩增程序为:94℃预变性5min,然后94℃变性30s、50~60℃退火1min、72℃延伸1.5min,40个循环,最后72℃延伸10min。本发明所述方法简便易行,扩增出的条带清晰稳定,多态性较好,有利于快速建立咸丰白术ISSR‑PCR优化反应体系,弥补了国内对咸丰白术遗传多样性研究的不足。本发明可用于咸丰白术遗传多样性分析、地道药材分子鉴定以及分子育种等方面的研究,具有较好的应用价值。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/