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快速筛选单拷贝转基因后代纯合家系的方法及应用
- 专利权人:
- 华中农业大学
- 发明人:
- 林拥军,陈太钰
- 申请号：
- CN201410833434.X
- 公开号：
- CN105803046A
- 申请日:
- 2014.12.29
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 张红兵
- 摘要：
- 本发明属于植物转基因领域，涉及一种快速筛选单拷贝转基因后代纯合家系的方法。利用农杆菌介导的遗传转化方法转化载体，用southern筛选阳性单拷贝转化植株，从T0代转基因株上收种子，播于苗床，取三叶期叶片，CTAB法抽提小样总DNA，以外源目的基因潮霉素和内源G3PDH基因设计real-time PCR引物；利用外源目的基因和內源基因的引物对小样DNA进行real-time PCR，比较计算外源目的基因和內源基因的扩增Ct值来判断转基因株的基因型；T1代结实以后通过发芽再次检测转基因株基因型，比较上述两个转基因株基因型是否吻合，选两个基因型都能吻合材料作为转基因育种或杂交转育或多基因聚合育种材料。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
