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适合转基因小麦定量检测的内标准基因引物设计及应用
- 专利权人:
- 华中农业大学
- 发明人:
- 廖玉才,李和平,赵正喜,瞿波,黄涛,张静柏,左东云,程伟,杨鹏
- 申请号：
- CN201410088887.4
- 公开号：
- CN103805711A
- 申请日:
- 2011.12.21
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2014
- 代理人:
- 王敏锋
- 摘要：
- 本发明公开了一种适合转基因小麦定量检测的内标准基因引物设计及应用，其步骤：A、通过NCBI数据库BlastN筛选物种特异性好的基因，查找非同源区段设计引物，扩增区段，将上下游序列进行Primer-Blast检测；B、选取16个不同物种种子和35个不同小麦品种灭菌消毒、萌发取叶片提取DNA；C、SouthernBlot鉴定候选特异性好的PSG719、UCB基因位点数为6个，拷贝数为2个；D、普通PCR鉴定内标准基因引物物种特异性：E、普通PCR鉴定内标准基因引物不同小麦品种间稳定性。确定两对引物做转基因小麦检测时的定性或定量检测内标准基因引物。方法易行，操作简便，定性检测极限为0.95个小麦基因组，定量检测为5个小麦基因组,通过Real-timePCR检测,线性关系良好。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
