Described herein are high affinity antigen binding constructs, e.g., antibodies, directed to the ECD2 domain of HER2. The antigen-binding constructs comprise at least one antigen- binding polypeptide construct that binds to ECD2 of HER2 (HER2 ECD2) with increased affinity compared to a wild-type 2C4 antibody. Such antigen-binding polypeptide constructs comprise one or more amino acid modifications in the framework region and/or CDRs compared to the amino acid sequence of a wild-type 2C4 antibody that increase affinity of the antigen- binding polypeptide construct for ECD2 by 2-fold or greater. The antigen-binding constructs can inhibit the growth of HER2-expressing breast cancer cells and gastric cancer cells. Antigen- binding constructs in biparatopic format are internalized in HER2-expressing cells.La présente invention concerne des constructions de liaison à un antigène d'affinité élevée, par exemple des anticorps, dirigées contre le domaine ECD2 de HER2. Les constructions de liaison à un antigène comprennent au moins une construction polypeptidique de liaison à un antigène qui se lie au domaine ECD2 de HER2 (ECD2 de HER2) avec une affinité élevée par comparaison avec un anticorps 2C4 de type sauvage. De telles constructions polypeptidiques de liaison à un antigène comprennent une ou plusieurs modifications d'acides aminés dans la région charpente et/ou les RDC, par comparaison avec la séquence d'acides aminés d'un anticorps 2C4 de type sauvage, qui augmentent l'affinité de la construction polypeptidique de liaison à un antigène pour le domaine ECD2 d'un facteur au moins égal à 2. Les constructions de liaison à un antigène peuvent inhiber la croissance de cellules du cancer du sein exprimant HER2 et de cellules du cancer gastrique. Les constructions de liaison à un antigène de forme bispécifique sont introduites dans les cellules exprimant HER2.
