本发明公开了一种TM4SF1特异性嵌合抗原受体,包含胞外识别区、铰链区、跨膜区和胞内信号区,其中胞外识别区为scFv序列,铰链区为CD8区域,跨膜区为CD8跨膜区或CD28跨膜区中的任一个,胞内信号区包含CD28、4‑1BB、CD3ζ中的至少一个;上述嵌合抗原受体具体为L6‑28Z、L6‑BBZ和L6‑28BBZ,其分别由SEQ ID NO.12~SEQ ID NO.14所示序列的核酸编码;本发明还提供一种包含上述核酸的重组表达载体及其宿主细胞、构建方法、在哺乳动物肿瘤治疗中的应用,本发明所述的TM4SF1特异性嵌合抗原受体可以通过修饰T细胞,并使特异性CAR‑T细胞高效特异的治疗实体肿瘤。