本发明公开了一种ZNF300基因重组载体及应用,首先,通过原位杂交方法验证了ZNF300与肺癌和结肠癌患者的相关性;其次,通过一系列分子生物学实验手段,研究了ZNF300促进肿瘤细胞增殖的分子机制;第三,构建ZNF300基因的正向cDNA序列重组载体pZNF300-IRES-eGFP和pCMV-ZNF300,以及构建ZNF300基因的反向cDNA序列重组载体pAS-ZNF300-IRES-eGFP和pCMV-AS-ZNF300,其含有的序列为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。一种ZNF300基因重组载体在制备治疗或预防肺癌和结肠癌药物中的应用。ZNF300基因在体外明显地促进肿瘤细胞增殖,抑制其表达则能够显著抑制肿瘤细胞增殖,细胞增殖的抑制率达到70%,有效地表达ZNF300基因或抑制ZNF300基因的表达。ZNF300及其相应重组载体,用于制备治疗或预防抗肺癌和结肠癌的药物方面,具有很好的应用前景。