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基于供体细胞DNA甲基化水平的修饰提高山羊克隆效率的载体、细胞及方法
- 专利权人:
- 西北农林科技大学
- 发明人:
- 张涌,刘军,韩成全,苏建民,毛廷超,王勇胜,康健
- 申请号:
- CN201711322629.8
- 公开号:
- CN107988257A
- 申请日:
- 2017.12.12
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 范巍
- 摘要:
- 本发明公开了一种基于供体细胞DNA甲基化水平的修饰提高山羊克隆效率的载体、细胞和方法。本发明提供的载体包括阻遏蛋白TetR表达载体和含有操纵基因TetO的双向表达载体,在融合前将两者共转染到供体细胞中。筛选阳性转染的细胞,药物诱导表达山羊TET3,将TET3诱导表达的阳性细胞作为最终供体细胞,再将其注入到去核后的卵母细胞并进行电融合,挑选成功融合的山羊体细胞克隆胚培养。本发明可以有效的降低供体细胞的甲基化水平,纠正克隆胚胎中的异常高甲基化现象,从而显著提高后期山羊体细胞克隆胚胎的发育率和质量,可以高效地体外生产山羊体细胞克隆胚胎,胚胎移植后的克隆山羊的出生率也显著提高。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/