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一种Hspa12b基因敲除小鼠模型的构建方法
- 专利权人:
- 南京医科大学附属逸夫医院
- 发明人:
- 鲁翔,赵璨,张康振,沈茜煜,高伟
- 申请号：
- CN202010751910.9
- 公开号：
- CN112011575A
- 申请日:
- 2020.07.30
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2020
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明公开一种Hspa12b基因敲除小鼠模型的构建方法，根据小鼠Hspa12b基因第3‑7外显子序列，基于CRISPR/Cas9系统设计靶向基因sgRNA；sgRNA与Cas9核酸酶的mRNA经体外转录后，显微注射到小鼠的精卵中，注射后的受精卵胚胎移植到假孕母鼠体内，获得F0小鼠；提取F0代小鼠尾部DNA，经PCR扩增产物测序，鉴定基因型，获得阳性F0代小鼠；将F0小鼠分别与野生型小鼠交配，获得杂合子小鼠F1代，并进行鼠尾鉴定；将F1代小鼠杂交获得F2代纯合子小鼠。本发明小鼠模型的构建方法研究HSPA12B特异性表达于血管内皮细胞中，参与调控内皮细胞的迁移、增殖和血管新生，适合用Hspa12b基因条件性敲除动物模型研究心血管问题，为诊断、治疗提供理论基础。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
