本发明涉及AFP重组蛋白和体外重组表达的方法,具体涉及一种人工信号肽-AFP-609aa-6his的重组蛋白和哺乳动物瞬时表达系统体外重组表达方法,其蛋白质序列如SEQ ID NO:1所示,a.将重组蛋白基因通过双酶切克隆到pcDNA3.1+载体中,构建pcDNA3.1+-AFP表达质粒,并进行质粒抽提;b.将抽提得到的pcDNA3.1+-AFP质粒用PEI转染进CHO-S悬浮细胞进行重组蛋白的表达;c.7天后分离纯化得到的重组蛋白。本发明通过大规模瞬时悬浮CHO-S表达系统制备的人工合成AFP蛋白活性跟天然AFP蛋白相近,且得到的纯度较高,内毒素含量低,无动物源性蛋白的污染,可以有望作为肝癌免疫治疗的肿瘤抗原疫苗。