Provided are a dual miRNA inhibitory expression vector, a construction method and an application thereof. The construction method for the dual miRNA inhibitory expression vector comprises connecting Tud RNA which targets miR140 and miR-424 onto a pLKO.1-puro cloning vector to obtain dual miRNA inhibitory expression vector pLKO-Tud-140-424. The dual miRNA inhibitory expression vector functions to inhibit the activity of has-miR-140 and has-miR-424.Linvention concerne un vecteur dexpression inhibant le micro-ARN double brin, son procédé de mise au point et son application. Le procédé de mise au point dun vecteur dexpression inhibant le micro-ARN double brin consiste à lier une cible avec lARN Tud de micro-R-424 et de micro-R140 sur un vecteur de clonage pLKO.1-puro afin dobtenir un vecteur dexpression inhibant le micro-ARN double brin pLKO-Tud-140-424. Le vecteur dexpression inhibant le micro ARN double brin inhibe laction de has-micro-R-140 et de has-micro-R-424.