Means have been disclosed that make it possible to produce a thick cell aggregate by a simple process without an operation of peeling and superposing cells. The method for producing a three-dimensional cell assembly according to the present invention includes a cell accommodation step of accommodating a cell suspension in a cell accommodation vessel, and a pressure application step of applying pressure to the cells in the vessel. The cell accommodation step and the pressure application step may be repeated a plurality of times. According to the method of the present invention, a thick and robust cell assembly can be obtained by a simple operation of applying pressure to a cell suspension or a medium containing cells. Since the operation of overlapping a plurality of cell sheets is not required, the damage to the cells is extremely small and the cells can be kept in a good state, which is advantageous when used as a tissue piece for transplantation.細胞を剥離して重ね合わせるという操作を経ずに、簡便な工程で厚みのある細胞集合体を作製することを可能にする手段が開示されている。本発明による三次元細胞集合体の作製方法は、細胞収容容器内に細胞懸濁液を収容する細胞収容工程、及び前記容器内の細胞に圧力を印加する圧力印加工程を含む。細胞収容工程及び圧力印加工程は、複数回繰り返して実施してもよい。本発明の方法によれば、細胞懸濁液ないしは細胞を含む媒体に圧力印加するという単純な操作のみで、厚みのある頑強性の高い細胞集合体を得ることができる。複数の細胞シートを重ね合わせるという操作も不要であるため、細胞に与えるダメージが極めて少なく、細胞が良好な状態を保てるので、移植用組織片として用いる場合にも有利である。