Provided are tRNA / pre-microRNA and tRNA / shRNA hybrid molecules and methods of making and using. Accordingly, in one aspect, a polynucleotide comprising a tRNA operably linked to a pre-microRNA (pre-miRNA) or short hairpin RNA (shRNA) is provided. In various embodiments, the tRNA is a methionyl tRNA. In various embodiments, the pre-miRNA (or shRNA) is selected from pre-miRNA-1291, pre-miRNA-34a, pre-miRNA-125b, pre-miRNA-124, pre-miRNA-27b, and pre-miRNA-22.tRNA/プレマイクロRNAおよびtRNA/shRNAハイブリッド分子ならびに作製方法および使用方法が提供される。従って、一局面では、プレマイクロRNA(プレmiRNA)またはショートヘアピンRNA(shRNA)に機能的に連結されたtRNAを含むポリヌクレオチドが提供される。様々な態様において、tRNAはメチオニルtRNAである。様々な態様において、プレmiRNA(またはshRNA)は、プレmiRNA-1291、プレmiRNA-34a、プレmiRNA-125b、プレmiRNA-124、プレmiRNA-27b、およびプレmiRNA-22より選択される。
