本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2蛋白纳米抗体及其应用。所述的纳米抗体命名为Nb12,其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明将截短表达的Nsp2重组蛋白免疫骆驼后分离骆驼外周血淋巴细胞利用RT‑PCR扩增经过免疫的双峰驼VHH基因,将其连入pCANTAB 5E噬菌体载体,构建双峰驼重链抗体可变区文库,利用噬菌体展示技术经过3轮淘选,共筛选到44株Nsp2特异性纳米抗体,试验证明这些纳米抗体能够与Nsp2蛋白特异性反应,其中Nb12有较强的结合力。抗病毒试验结果表明在接毒量为0.01个MOI时,纳米抗体Nb12在PAM细胞和Marc‑145细胞上均显示出对病毒复制的抑制作用。因此,本发明的提出为后续PRRSV Nsp2的研究以及PRRSV的防控和诊断提供了新的技术手段。