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生产转基因山羊的piggyBac转座子载体构建方法及其应用
- 专利权人:
- 西北农林科技大学
- 发明人:
- 陈玉林,白丁平,方堃,杨明明,何晓琳
- 申请号:
- CN201110041486.X
- 公开号:
- CN102181467A
- 申请日:
- 2011.02.21
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2011
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明公开了一种能用于生产转基因山羊的piggyBac转座子载体的构建方法,主要步骤包括:①合成一段包含piggyBac转座子发生转座所必需的PB5′端和PB3′端碱基序列,合成时在PB5′端和PB3′端中间预留出多克隆位点,然后将该序列克隆到pBluSKm载体中构建成pBluSKm-PB载体;再将瘤胃特异表达启动子PRD-SPRR II、经密码子偏好性优化的半胱氨酸合成基因cysE和cysM、Neomycin抗性基因和绿色荧光蛋白基因克隆到pBluSKm-PB载体中最终构建成pBluSKm-PB-PRD-cysEM-NEO-EGFP转座子载体。本发明所获得的转座子载体能够满足细胞筛选、倒置荧光显微镜下显微操作和生产转基因山羊等要求。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/