本发明提供了一种抗CD19单克隆抗体,其VH链的互补决定区CDR具有选自下组的CDR的氨基酸序列:SEQ ID NO:3所示的重链CDR1,SEQ ID NO:4所示的重链CDR2,SEQ ID NO:5所示的重链CDR3;其VL链的互补决定区CDR具有选自下组的CDR的氨基酸序列:SEQ ID NO:6所示的轻链CDR1,SEQ ID NO:7所示的轻链CDR2,SEQ ID NO:8所示的轻链CDR3。本发明还提供了所述单克隆抗体的制备方法及其应用。该单克隆抗体可特异性识别细胞表面的人CD19蛋白;以1×10‑7M或更低的KD与人CD19结合;具有免疫原性低,不引起HAMA反应等优点。