一种永生化特络细胞系及其构建方法
- 专利权人:
- 复旦大学附属中山医院
- 发明人:
- 王向东,宋东莉
- 申请号：
- CN201710272011.9
- 公开号：
- CN107034238A
- 申请日:
- 2017.04.24
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 周春洪
- 摘要：
- 本发明涉及一种永生化特络细胞系的构建方法，包括如下步骤：(1)将剪碎的小鼠肺脏组织块于二型胶原酶中消化，过滤，离心，收集细胞沉淀，在培养基中培养，待成纤维细胞贴壁后，将上清转移至另一培养皿，培养12小时后换液，继续培养3‑5天；(2)用微量枪头作为细胞刮，刮除成纤维细胞，反复多次刮除后，进行特异性结构telopode的观察和免疫标记鉴定特络细胞；(3)以特络细胞作为宿主细胞，用含有SV‑40‑大T抗原的逆转录病毒载体感染宿主细胞，经过传代、筛选、鉴定。本发明的永生化特络细胞系培养至50代仍然保持较为稳定的状态，解决了现有技术多次分离和提取无法保证特络细胞纯度和稳定性的问题。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
