Mutein faktoru VIII, odpovídající DNA sekvence, vektor a hostitelská bunka, farmaceutická kompozice, zpusob produkce muteinu a imortalizovaná lidská bunecná linie
Mutein faktoru VIII, v nemz je doména B mezi pozicemi Arg740 a Glu1649 nahrazena peptidovým linkerem bohatým na arginin se sekvencí Ser Phe Ser Gln Asn Ser Arg His Gln Ala Tyr Arg Tyr Arg Arg Gly, kde císlování faktoru VIII je vztazeno k maturní sekvenci faktoru VIII divokého typu ukázané v SEQ ID NO:2. DNA sekvence kódující tento mutein, vektor obsahující tuto DNA a hostitelská bunka transformovaná tímto vektorem. Farmaceutická kompozice obsahující tento mutein nebo vektor. Pouzití tohoto muteinu nebo vektoru pro prenos genu pro výrobu léciva pro lécení hemofilie, zejména hemofilie A. Zpusob produkce tohoto muteinu, který zahrnuje (a) kultivaci výse uvedených transformovaných hostitelských bunek a (b) izolaci muteinu z kultivacního media. Imortalizovaná lidská bunecná linie stabilne exprimující alespon jeden virový transkripcní aktivátorový protein a nesoucí výse uvedený vektor.In the present invention, there is disclosed a factor VIII mutein in which the B-domain between positions Arg740 and Glul649 has been replaced by an Arg-rich linker peptide with a sequence Ser Phe Ser Gln Asn Ser Arg His Gln Ala Tyr Arg Tyr Arg Arg Gly, wherein said factor VIII numbering is relative to the mature wild-type factor VIII sequence shown in SEQ ID NO : 2. There is also disclosed a DNA sequence coding for the mutein, a vector comprising this DNA and a host cell being transformed with the vector. Further disclosed is a pharmaceutical composition containing comprising the factor VIII mutein or the vector, the use of the factor VIII mutein or a gene transfer vector for preparing a medicament for treating hemophilia, preferably treating hemophilia A. Also disclosed is a method for the production the above-described factor VIII mutein, which production process comprises: (a) culturing the above-indicated transformed host cells； and (b) isolating the factor VIII mutein from the culture broth. There is also disclosed an immortalized human cell line stably expressing at least one viral tr
