本发明公开了一种红豆杉多糖及其制备方法和应用。该制备方法包括分离纯化,分离纯化包括:以NaCl溶液为洗脱剂,利用DEAE sepharose fast flow树脂柱对粗多糖进行分离,获得浓度为0.3M的NaCl溶液洗脱的目标馏分;以去离子水为洗脱剂,利用Sephdex G‑10凝胶柱对目标馏分进行分离,在保留时间为30min时获得红豆杉多糖。该红豆杉多糖的重均分子量为73527Da,由葡萄糖、木糖、甘露糖、阿拉伯糖、鼠李糖和半乳糖以摩尔比1:0.38:0.31:3.11:1.34:1.92组成;主链以(1→3)‑阿拉伯糖和(1→4)‑半乳糖为骨架,对胃癌细胞SGC‑7901具有显著的诱导凋亡作用。