There is provided a method for preparing a pharmaceutical composition containing a thermostable hemoglobin-based oxygen carrier favored by beta-beta crosslinking. The results of the present invention can be used to control the oxygen affinity of the resulting molecule and thus produce a hemoglobin-based oxygen carrier tailored to the particular application. Cross-linked hemoglobin with low oxygen affinity is useful for applications requiring rapid tissue oxygen supply (e.g., hemorrhagic shock), while cross-linked hemoglobin with high oxygen affinity requires low-rate oxygen supply Lt； / RTI >； Highly purified and thermostable cross-linked non-polymeric cross-linked tetrameric hemoglobin is produced that has 40-60% or more of the beta-beta linkage and is suitable for use in mammals without causing renal damage. A high temperature short time (HTST) heat treatment step is performed to effectively remove undesirable dimeric forms of hemoglobin, noncrosslinked tetrameric hemoglobin, and plasma protein impurities.베타-베타 가교결합이 선호된 열 안정성의 헤모글로빈 기반의 산소 담체를 함유하는 약학 조성물의 제조방법이 제공된다. 본 발명의 결과를 사용하여 생성된 분자의 산소 친화력이 제어될 수 있으며 그리하여 특정 용도에 맞춘 헤모글로빈 기반의 산소 담체를 생성할 수 있다. 낮은 산소 친화력의 가교결합된 헤모글로빈은 신속한 조직 산소공급(예, 출혈성 쇼크)을 요구하는 용도에 유용한 반면, 높은 산소 친화력의 가교결합된 헤모글로빈은 낮은 속도의 산소공급(예, 암 부가요법)을 요구하는 용도에 유용하다. 40-60% 이상의 베타-베타 가교결합을 가지며 신장 손상을 유발하지 않고 포유류에게 사용하기에 적합한 고도로 정제되고 열 안정성의 가교결합된 비-중합체성 가교결합된 사량체 헤모글로빈이 생성된다. 고온 단시간 (HTST) 열처리 단계를 수행하여 바람직하지 못한 이량체 형태의 헤모글로빈, 가교결합되지 않은 사량체 헤모글로빈, 및 혈장 단백질 불순물을 유효하게 제거한다.
