Kuzmina Tatjana Ivanovna,Кузьмина Татьяна Ивановна,Tatarskaja Diana Nikolaevna,Татарская Диана Николаевна,Stanislavovich Tatjana Ivanovna,Станиславович Татьяна Ивановна
申请号：
RU2015136086/13
公开号：
RU0002602448C1
申请日:
2015.08.25
申请国别(地区):
RU
年份:
2016
代理人:
摘要：
FIELD: biotechnology.SUBSTANCE: invention relates to reproductive biotechnology, namely to a method for in vitro culturing of oocytes in cows. Method includes assessment of growth phase of oocytes separated from the ovaries of slaughtered cows using the standard methods, method for dying with diamond crystal blue dye, separation of oocytes completed their growth and culturing in the medium of TS-199 containing 20 % of bovine serum, 50 ng/ml of bovine prolactin, 0.55 mg/ml of calcium lactate, 0.23 mg/ml of sodium pyruvate, 1.27 mg/ml of HEPES, 50 mcg/ml of gentamycin and granular cells in the concentration of 1 million/ml. Culturing is carried out for 15 hours, then oocytes are moved into the medium additionally containing human chorionic gonadotropin in amount of 10 m units/ml and are cultivated for another 15 hours.EFFECT: invention allows to increase the number of oocytes matured in the process of in vitro culturing.1 cl, 1 tblИзобретение относится к области репродуктивной биотехнологии, а именно к способу экстракорпорального культивирования ооцитов коров. Способ включает оценку фазы роста ооцитов, выделенных стандартными методами из яичников коров после убоя, методом окрашивания бриллиантовым кристаллическим голубым, отделение не завершивших рост ооцитов и культивирование их в среде ТС-199, содержащей 20% бычьей сыворотки, 50 нг/мл бычьего пролактина, 0.55 мг/мл лактата кальция, 0.23 мг/мл пирувата натрия, 1.27 мг/мл HEPES, 50 мкг/мл гентамицина и клетки гранулезы в концентрации 1 млн/мл. Культивирование проводят в течение 15 ч, затем ооциты перемещают в среду, дополнительно содержащую хорионический гонадотропин человека в количестве 10 м.ед/мл и культивируют еще 15 ч. Использование изобретения позволит повысить доли ооцитов, созревших в процессе экстракорпорального культивирования. 1 табл.
