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一种可用于检测猪圆环病毒2型抗体的Cap抗原的制备方法
- 专利权人:
- 中国农业科学院兰州兽医研究所
- 发明人:
- 刘湘涛,尹双辉,尚佑军,孙世琪,刘艳红
- 申请号：
- CN200710075255.4
- 公开号：
- CN101101296A
- 申请日:
- 2007.07.20
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2008
- 代理人:
- 吕晓蕾
- 摘要：
- 一种制备可用于检测猪圆环病毒2型抗体的Cap抗原的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)PCR克隆PCV2 ORF2的编码基因；(2)构建重组表达载体rCap；(3)在改良的LB液体培养基中，依次37℃诱导和低温长时间诱导rCap表达；(4)纯化rCap蛋白；其中所述改良的LB液体培养基包含6-9g/L蛋白胨、6-9g/L氯化钠以及2-4g/L酵母提取物；诱导rCap表达所使用的诱导剂为IPTG，其最终浓度为0.05-0.2mol/L；诱导rCap表达的第一诱导温度为37℃，第二诱导温度为16-20℃；诱导rCap表达的第一诱导时间为3-6小时，第二诱导时间为12-20小时。该方法促进了rCap在大肠杆菌中表达产生可溶性rCap蛋白，减少了包涵体的形成，避免了复杂的变性、复性过程，同时分离纯化所得可溶性rCap蛋白的生物学活性接近于PCV2病毒天然蛋白。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
