The present invention relates to an antibody targeting VEGFR-2, particularly a novel type of dual target antibody in which the 11th to 12th calcium-binding EGF-like domains of human Notch1 are bound to the N-terminus of the Tanibiru map light chain, A recombinant expression vector containing the gene, a host cell transformed with the recombinant expression vector, and a method for producing a double target antibody by culturing the host cell, a pharmaceutical composition comprising the double target antibody, and a human DLL4 The present invention relates to a method for measuring the antagonistic activity of DLL4 of the double-target antibody, wherein the Notch 1 activity is measured by co-culturing a human umbilical cord endothelial cell (HUVEC) and a cell line expressing hDLL4. The dual target antibody according to the present invention can more effectively and simultaneously inhibit signal transduction according to the two pathways of VEGF / VEGFR-2 and DLL4 / Notch1, thereby treating various angiogenesis-related diseases such as tumors, It is possible to overcome the tolerance caused by the use of the cancer stem cells and to directly prevent cancer stem cells from recurring.본 발명은 VEGFR-2를 표적으로 하는 항체, 특히 타니비루맵 경쇄의 N-말단에 인간 Notch1 의 11~12번째 calcium-binding EGF-유사 도메인이 결합된 신규한 형태의 이중표적항체, 이를 코딩하는 유전자, 이 유전자를 포함하는 재조합 발현 벡터, 이 재조합 발현 벡터로 형질전환된 숙주세포 및 이 숙주세포를 배양하여 이중표적항체를 제조하는 방법, 상기 이중표적항체를 포함하는 약제학적 조성물 및 인간 DLL4(hDLL4)를 발현하는 세포주와 인간탯줄내피세포(HUVEC)의 공배양을 통해 Notch 1 활성을 측정하는 것을 특징으로 하는 상기 이중표적항체의 DLL4 길항 효능 측정방법에 관한 것이다.본 발명에 따른 이중표적항체는 VEGF/VEGFR-2 및 DLL4/Notch1의 두 가지 경로에 따른 신호전달을 보다 효율적으로 동시에 저해함으로써 종양 등 다양한 혈관신생 관련 질환을 치료할 수 있으며, 특히 신생혈관치료제를 단독으로 사용함에 따라 발생되는 내성을 극복할 수 있으며, 암줄기세포를 직접 타겟팅함으로써 암의 재발을 근본적으로 방지할 수 있다는 장점이 있다.
