Provided is an automated manufacturing method of a cell sheet using a 3D bioprinter, consisting of a first nozzle comprising a media and an extracellular matrix (ECM); and a second nozzle comprising a temperature sensitive bio-ink and a cell. The present invention can easily separate the cell sheet from a scaffold.COPYRIGHT KIPO 2020매질(media)과 ECM(extracellular matrix)을 포함하는 제1 노즐; 및 온도 감응성 바이오 잉크와 세포를 포함하는 제2 노즐;로 이루어진 3D 바이오 프린터를 이용한 셀 시트의 자동화 제조 방법이 제공된다.