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一种具有脑靶向作用的多亚基蛋白质及其制备方法、用途
专利权人:
广东工业大学
发明人:
王华倩,周小芬,林卫萍,张焜,王真史,杜志云,郑希,方岩雄,赵肃清,黄宝华
申请号:
CN201410578270.0
公开号:
CN104387472A
申请日:
2014.10.24
申请国别(地区):
CN
年份:
2015
代理人:
摘要:
本发明公开了一种具有脑靶向作用的多亚基蛋白质及其制备方法、用途。利用不相容的双质粒系统在大肠杆菌中表达霍乱毒素B亚基,和增强型绿色荧光蛋白、霍乱毒素A亚基、穿膜肽三种蛋白的融合蛋白EGFP-CTA2-TAT,通过PCR扩增得到CTB基因,将该基因片段克隆到载体pET-28a中,获得重组质粒pET-28a-CTB;以野生型CTA2、EGFP、TAT氨基酸序列为模板,在EGFP与CTA2之间插入3个酶切位点和linker,优化获得适宜在大肠杆菌中表达的密码子,将基因片段克隆到载体PET-22b(+)中,获得重组质粒PET-22b-EGFP-CTA2-TAT;利用PET-28a-CTB和PET-22b-EGFP-CTA2-TAT二者不同抗性,将其共转化到大肠杆菌BL21中,在氨苄青霉素和卡那青霉素的双抗性选择压力下,筛选获得工程菌,该工程菌经IPTG诱导表达后,可获得CTB5/EGFP-CTA2-TAT嵌合蛋白。本发明同时公开了该蛋白质的制备方法及用途。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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