POSAS GARRIGA, Mr. Francesc,DE NADAL CLANCHET, M Eulàlia,GUBERN BURSET, Albert,JOAQUÍN CAUDET, Manuel
申请号：
EPEP2017/058379
公开号：
WO2017/174783A1
申请日:
2017.04.07
申请国别(地区):
EP
年份:
2017
代理人:
摘要：
The invention provides a method based on the finding that phosphorylation of RB protein in the N-terminal domain, namely at Serine (249) and Threonine (252) of human RB, leads to a conformational change that makes RB insensitive to CDK inactivation, promoting a cell cycle delay that reduces cell proliferation in cancer cells. The method identifies as candidates to anticancer drugs those compounds that give rise to modifications analogous to those provoked by RB phosphorylation in the N-terminal domain, mainly increased affinity of RB for E2F, decreased transcription of E2F and/or decreased expression of E2F-dependent genes, increased RB binding to E2F-dependent promoters or decreased cell proliferation. The method can be also carried out measuring the expression of an indicator gene operatively linked to an E2F-dependent promoter. Expression vectors of mutated retinoblastoma proteins mimicking phosphorylation at the N-terminal domain are also provided for therapeutic use.L'invention concerne un procédé basé sur la découverte du fait que la phosphorylation de la protéine de rétinoblastome (RB) dans le domaine N-terminal, à savoir la sérine (249) et la thréonine (252) de RB humaine, conduit à un changement de conformation qui rend la RB insensible à l'inactivation de CDK, ce qui favorise un retard de cycle cellulaire qui réduit la prolifération cellulaire dans des cellules cancéreuses. Le procédé identifie, en tant que candidats pour des médicaments anticancéreux, les composés qui donnent lieu à des modifications analogues à celles provoquées par la phosphorylation de la RB dans le domaine N-terminal, principalement une affinité accrue de la RB pour E2F, une transcription réduite de E2F et/ou une expression réduite de gènes dépendant de E2F, une liaison de la RB accrue à des promoteurs dépendant de E2F ou une prolifération cellulaire réduite. Le procédé peut également être mis en œuvre par la mesure de l'expression d'un gène indicateur lié fonctionnellement à un promo
