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编辑家蚕基因组TALE重复区的高效组装方法及其骨架载体
- 专利权人:
- 西南大学
- 发明人:
- 夏庆友,王峰,徐汉福,马三垣,王元成,袁林,赵萍,向仲怀
- 申请号：
- CN201310049848.9
- 公开号：
- CN103131695B
- 申请日:
- 2013.02.07
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2014
- 代理人:
- 赵荣之
- 摘要：
- 本发明公开了编辑家蚕基因组TALE重复区的高效组装方法，具体为：先将含X个碱基的随机序列顺序编号，然后按编号分成Y个组，每组含有1-4个碱基；然后设计扩增TALE重复单元的引物对，该引物对含有无缝连接相邻TALE重复单元的II型限制性内切酶识别位点和特异接头，再利用设计的引物对分别以4种RVD重复单元为模板进行PCR扩增，得PCR产物库；将碱基数为X的靶序列按相同方法进行编号并分组，然后从PCR产物库中取与靶序列编号相同的并识别相应碱基的PCR产物，将同组的PCR产物混合后进行GoldenGate连接，然后将连接产物再进行GoldenGate连接，得含X个重复单元的TALE重复区；利用本发明的方法，不需要合成大量的DNA，成本低，能用于制备编辑家蚕基因组的TALE重复区。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
