直接采用DGGE割胶条带浸出液的PCR产物进行测序的方法
- 专利权人:
- 福建医科大学
- 发明人:
- 黄志清,陈强,王智耀,翁芳霞
- 申请号：
- CN201510531035.2
- 公开号：
- CN105039570B
- 申请日:
- 2015.08.27
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 蔡学俊
- 摘要：
- 本发明属于微生物生态学领域。为了克服DGGE割胶条带浸出液的PCR产物往往含有目标片段外的背景产物，导致直接测序不准确甚至失败的不足；本发明提供了一种DGGE割胶条带浸出液的处理方法：首先利用变性退火步骤使得浸出液中的目标片段和混杂的少量污染片段中的大部分形成异源杂交双链，再用错配酶切除异源杂交双链从而大大消除污染片段，同时目标片段含量并未受大的损失。由于模板得到净化其扩增将得到单一的PCR产物，就可以直接进行测序，从而避免了繁琐的克隆环节，因此可以在很低的成本下快速简便地得到准确的条带所含片段的序列信息。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
