The invention comprises methods of identifying and isolating spermatagonial stem cells in testicular tissue samples by the use of markers unique to spermatagonial stem cells. The invention defines and characterizes a unique testicular cellular niche wherein spermatagonial stem cells reside. The invention also comprises methods of identifying and isolating multipotent testicular stromal cells, on which spermatagonial stem cells can be cultured. Cultured spermatagonial stem cells, derived from prepubertal males or cancer patients can be utilized to generate viable spermatozoon or may be subsequently transplanted back into the donor to restore fertility.La présente invention concerne des procédés didentification et disolement de cellules souches spermatagoniales dans des échantillons de tissus testiculaires par lutilisation de marqueurs uniques aux cellules souches spermatagoniales. Linvention définit et caractérise une niche cellulaire testiculaire unique dans laquelle résident les cellules souches spermatagoniales. Linvention concerne également des procédés didentification et disolement de cellules du stroma testiculaire multipotentes, sur lesquelles les cellules souches spermatagoniales peuvent être cultivées. Les cellules souches spermatagoniales cultivées, provenant de sujets masculins prépubertaires ou de patients atteints du cancer, peuvent être utilisées pour générer des spermatozoïdes viables ou peuvent ensuite être retransplantées dans le donneur pour restaurer la fécondité.