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一种转基因水稻Bt蛋白cry2a的原核表达及纯化方法
- 专利权人:
- 上海市农业科学院
- 发明人:
- 唐雪明,赵凯,刘启文,杨奇,吴潇,朱宏,谭芙蓉,王金斌,陶世如,蒋玲曦,程凯,魏曼曼
- 申请号：
- CN201010578641.7
- 公开号：
- CN102094039A
- 申请日:
- 2010.12.08
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2011
- 代理人:
- 费开逵
- 摘要：
- 本发明公开了一种转基因水稻Bt蛋白cry2a的原核表达及纯化方法，包括以下步骤：1)根据华中农业大学测序好的cry2a的基因，以及所要连接的载体PMD18-T的多克隆位点设计正、反向引物，进行PCR扩增和回收，并对PCR回收物进行DNA连接反应；2)大肠杆菌感受态细胞DH5α的制备和转化；3)表达质粒的重组构建、重组菌的诱导表达；4)表达蛋白Ni-NTA亲和层析纯化。采用本发明方法得到的目的蛋白纯度达到90％以上，同时利用本发明制备的高纯度转基因水稻Bt蛋白cry2a可获得抗体，并可制作成胶体金免疫层析试纸条，以便在转基因植物检测中快速、准确的检测出Bt基因。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
