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一种利用重组羰基还原酶催化制备(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的方法
- 专利权人:
- 江南大学
- 发明人:
- 倪晔,宿宇宁,李海东,薛天芸
- 申请号:
- CN201210137695.9
- 公开号:
- CN102618590A
- 申请日:
- 2012.05.07
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2012
- 代理人:
- 时旭丹`刘品超
- 摘要:
- 一种利用重组羰基还原酶催化制备(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的方法,属于生物工程技术领域。本方法从枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)CGMCC NO.1.1508中克隆了羰基还原酶(IolS)和葡萄糖脱氢酶(GDH)基因片段,采用双启动子法串联表达IolS基因和GDH基因,构建重组质粒pET24a-G-T7-I,并将该质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)。以该大肠杆菌重组质粒的无细胞提取物为催化剂,2-氧代-4-苯基丁酸乙酯为底物,葡萄糖为辅底物,在不添加或添加少量NADP+辅因子的条件下,进行生物转化制备(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯,产物的对映体过量值高于99.5%。本发明通过IolS和GDH的共表达,实现细胞内辅因子NADP(H)的高效再生,降低了生产成本,具有很好的工业应用前景。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/